株式会社セルシード：研究製品

■UpCellの特徴
・独自のナノ表面設計により温度応答性ポリマー(PIPAAｍ)を器材表面に固定化しました。
・これにより器材表面は32度を境に可逆的に疎水性(細胞接着表面)親水性(細胞遊離表面)に変化。トリプシン等、細胞に損傷を与える酵素を一切用いることなく、温度を20-25度にして10-30分程度待つだけで、無傷な細胞がシート状に回収できます。

■UpCellのメリット
細胞シート回収のイメージ図

・回収した細胞シートは細胞外マトリクスを保持しているため、移植の際に縫合が一切不要です。。
・また、細胞外に発現しているタンパク質なども低損傷なため、細胞シート同士を重ねた3D培養も容易です。
・なお、温度応答性ポリマーは器材表面に共有結合されていますので、細胞回収とともに剥がれることは一切ありません。安心してお使い頂けます。
>>詳しい内容は技術情報をご覧下さい。

UpCellと通常培養皿との細胞回収比較

■アプリケーション
・再生医療に用いる組織の培養に
・ホモ/ヘテロな細胞シートを重ねる3D培養
>>アプリケーションデータはこちらから

■UｐCell使用上の注意

細胞の培養
●使用する培地をあらかじめ37℃に温めます。
●細胞播種時は、温めた培地を必ず使用して下さい。
●細胞が1箇所に集中して増殖するのを避ける為に、細胞は出来るだけ培養皿表面に均一になるよう播種して下さい。
●ウェル表面は32℃以上で疎水性になりますので、細胞の培養は必ず32℃以上で行って下さい。(弊社推奨培養温度は37℃です)
●培地の交換等は表面処理を施していない通常の培養皿と同様の方法で行って下さい。また、交換する培地は必ず37℃に温めたものを使用して下さい。
●細胞が付着しにくい場合は、コラーゲン、フィブロネクチン、ポリLリジンの器材表面へのコーティングあるいは血清入りの培地を使用して下さい。
※細胞の種類によっては、やや付着が遅いものがあります。予め御了承下さい。
●室温下での作業（顕微鏡による観察など）は短時間で行って下さい。

細胞の回収
●培養表面は32℃以下で親水性となり、細胞が遊離しやすくなります。
●細胞を回収する時は温度を20℃程度に下げ、30分ほどそのまま静置して下さい。細胞の種類によっては自然に遊離します。
●20℃に温度低下後、30分程度静置しても細胞が付着したままの場合、ウェル内の培地を穏やかにピペッティングすると、付着していた細胞が剥がれてきます。
※細胞の種類によっては完全に剥がれないものがあります。予め御了承下さい。
●細胞がコンフルエントになる前に温度を下げる方が、細胞懸濁液の調製は容易です。
●本製品はディスポーザブルタイプです。繰り返しのご使用は控えて頂ける様お願い致します。
●直射日光を避けて常温で保管して下さい。

■UpCellを使用した細胞シートの回収方法
（＊写真はPVDF膜を使用しています）

1)細胞が十分コンフルエントになったら、細胞が浸る程度に培地量を調整し、10-30分程度温度処理を行います。
2)温度処理を行った後、細胞シート支持体として吸水性のある膜(品番CSD001：CellShifterやPVDF膜など推奨)をUpCell表面に優しく静置します。
3)細胞シートの端を支持体に引っ掛け、ゆっくりと支持体をディッシュ表面より剥がします。
※1　剥がれやすい細胞は温度処理前に膜を静置して下さい。
※2　CellShifterご使用の場合、細胞シートを引っ掛ける必要はございませんので、細胞シートの回収がより容易です。

細胞シート回収とトランスファーの詳しいプロトコルはこちらから