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1)　温度処理による細胞の遊離
2)　剥離後、再播種されたA549の再付着性
3)　剥離手法の違いによるE-カドヘリンのイムノブロット比較
4)　剥離手法の違いによるCD140aのフローサイトメトリー比較
5)　剥離手法の違いによるマクロファージの回収比較
6)　剥離手法の違いによるマクロファージの再付着性
7)　マクロファージ様シングルセル回収プロトコル
8)　樹上細胞(DC)様シングルセル回収プロトコル
9)　CellShifterを使用した細胞シートの回収とトランスファープロトコル(3.5cmUpCell)
10)　ゼラチンを使用した細胞シートの積層化プロトコル(3.5cmUpCell)
11)　細胞シートの移植アプリケーション例
12)　細胞シートの積層化のアプリケーション例


 ■RepCell・UpCellデータ集

12)　細胞シート移植アプリケーション例

細胞シートの積層化(3D培養)により心臓組織を模倣!


心筋細胞シート同士を重ねる。
表面のタンパク質が保持されているのでギャップジャンクションも容易に形成
3D心筋細胞シートの出来上がり


細胞外マトリクスが保持されているから積層化したシート同士の接着が良好です。
積層化したシート同士は電気的に結合します。
電気的結合は30分で完了します。
両シートの単層領域の電気スパイクのタイミングはシンクロナイズします。

"Electrical coupling of cardiomyocyte sheets occurs rapidly via functional gap junction formation." Y.Haraguchi, T.Shimizu, M.Yamato, A.Kikuchi, T.Okano, Biomaterials., 27, 4765-4774 (2006)


ヘテロな細胞シートの積層化(3D培養)により、生体内環境を限りなく再現


血管内皮細胞(HAEC)を肝細胞に積層化して共培養。
赤はファロイジン染色した血管内皮細胞。
緑は抗アルブミン抗体で染色した肝細胞
"Novel approach for achieving double-layered cell-sheets co-culture: overlaying endothelial cell-sheets onto monolayer hepatocytes utilizing temperature-responsive culture dishes." M.Harimoto, M.Yamato, M.Hirose, C.Takahashi, Y.Isoi, A.Kikuchi and T.Okano, J.Biomed. Mater. Res., 62, 464-470 (2002)